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原代細胞和傳代細胞培養(yǎng)有哪些區(qū)別


原代細胞和傳代細胞培養(yǎng)有含義、培養(yǎng)過程、培養(yǎng)結(jié)果和應(yīng)用四個方面區(qū)別:

 

01 / 含義不同

原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)是將培養(yǎng)物放置在體外生長環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程。
傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進行培養(yǎng)的過程。

 

02 / 培養(yǎng)過程不同

原代培養(yǎng)將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖。培養(yǎng)過程相對復(fù)雜,培養(yǎng)條件要求也高,在所有的操作過程中,都須保持培養(yǎng)物及生長環(huán)境的無菌。

傳代培養(yǎng)是在原代細胞基礎(chǔ)上通過胰酶等物質(zhì)消化后繼續(xù)用于細胞培養(yǎng)的細胞,它與原代細胞具有相同核型。這類細胞在體外可以無.限制分裂。一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存,傳代細胞容易增殖。但也要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次蕞好只進行一種細胞的操作。

 

03 / 培養(yǎng)結(jié)果不同

原代培養(yǎng)細胞會分裂。原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長就會出現(xiàn)停滯,大部分細胞衰老死亡。細胞接種后一般幾小時內(nèi)就能貼壁,并開始生長,如接種的細胞密度適宜,5天到一周即可形成單層。

傳代培養(yǎng)一般傳到40到50代。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2到4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。

 

04 / 應(yīng)用不同

原代細胞培養(yǎng)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實踐。例如,用從手術(shù)中切除的腫瘤細胞進行原代培養(yǎng),然后用該培養(yǎng)細胞進行抗癌藥物的篩選,來幫助選擇有效的化療方案。

傳代培養(yǎng)主要應(yīng)用在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,如口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重新構(gòu)建結(jié)構(gòu)復(fù)雜的牙根,還有改良羊水細胞培養(yǎng)技術(shù),可多次獲得有效地細胞克隆,大大提高培養(yǎng)成功率,增加了可分析核型數(shù)量,提高了產(chǎn)前診斷工作的質(zhì)量和效益。

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