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食品中細菌的提取-沙門氏菌的檢測


一、沙門氏菌檢測

沙門氏菌病是指由各類型沙門氏菌所引起的對人類、家畜以及野生禽獸不同形式的總稱。沙門氏菌的病原體。屬腸菌科,革蘭氏陰性腸道桿菌。已發(fā)現的近一千種(或菌株)。按其抗原成分,可分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。

實驗過程
1、稱取25g(mL)樣品放入盛放有225mL緩沖蛋白胨水(BPW)的無菌拍打均質袋中,用拍打式均質器拍打1min-2min。如需調整pH值,用1mol/L無菌NaOH或HCL調pH至6.8±0.2
2、使用均質袋,可直接進行培養(yǎng)于36℃±1℃,培養(yǎng)8h~18h
3、輕輕搖晃培養(yǎng)過的樣品混合物,取1mlL(可使用SOCOREX稀釋移液器),轉種于10mL亞硒酸鹽胱氨酸増菌液SC內,于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。同時取1mL,轉種于10mLTTB內,于42℃±1℃培養(yǎng)
4、分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán),劃線接種于一個BS瓊脂平板于36℃±1℃培養(yǎng)40h~48h和一個HE瓊脂平板于36℃±1℃分別培養(yǎng)18h~24h觀察各個平板上生長的菌落

各個平板上生長的菌落
* BS瓊脂 菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色 或灰色,菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色;
* HE瓊脂 藍綠色或藍色,多數菌落中.心黑色或幾乎黑色;有些菌株為黃色,中.心黑色或幾乎全黑色
* XLD 瓊脂 菌落呈粉紅色,或帶不帶黑色中.心,有些菌株可呈現大的帶光澤的黑色中.心,或呈現全.部黑色的菌落;有些菌株為黑色菌落,帶或不帶黑色中.心鑒定  采用的試劑進行鑒定。


二、拍打式均質器和稀釋移液器

1、wiggens拍打式均質器

 

* 細菌萃取,經過拍打式均質后細菌沒被損壞
* 容易插入均質袋, 在均質結束時,葉片并排停靠。密封系統防止液    體從均質袋頂部溢出
* 鋼化玻璃制可視窗,易于觀察(W 型)
* 工作時間1s-9min59s可調,或者選擇連續(xù)工作模式免維護
* 無碳刷電機
 

2、socorex稀釋移液器

 

移液器的金屬吸嘴可以安裝細而長的麥管吸頭,所以該移液器可以從細長的容器中取樣 ( 如拍打均質器的樣品袋 )在細菌學的研究中,該移液器經常用來替代刻度玻璃移液管進行1:10稀釋樣品研究。

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